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冠状病毒的诊断检测是通过扩增SARS-CoV-2特异性序列来检测病毒核酸,SARS-CoV-2是由较不稳定且易于降解的RNA组成,在这样的情况下,在错误或不达标的环境条件中存储病毒样品会导致假阴性,再者微生物的存在也会污染病毒样品。由于这些原因,各国疾控中心都将冠状病毒的正确收集和保存作为诊断的较重要步骤。
中科检测可开展针对流感病毒、肠道病毒、冠状病毒、疱疹病毒等病毒保存液病毒灭活效果检测,病毒保存液检测可针对不同保存温度、不同保存时间等不同条件下的病毒活性及病毒灭活率。
病毒保存液检测方法
1、病毒保存液检测对象
毒株:甲型流感病毒HINI (VR- 1469)
细胞:MDCK细胞
2、病毒保存液检测步骤:
1)取样品病毒保存液(非灭活型) 9.8mL,加入0.2mL病毒原液混匀,分装若干测试液,存至要求温度;
2)保存至对应天数后取出测试液,检测病毒滴度;
a)10倍倍比稀释测试液;
b)将稀释液加入含生长至单层的MDCK细胞的96孔细胞培养板上,并设置正常对照组,加等量培养液;
c)置于35'C、5%CO2的培养箱中孵育60 min后弃去上清液,加入双抗400 IU/mL的维持培养液继续孵育3~5天,每天观察细胞增长状况;
d)当接种病毒的MDCK细胞出现变圆或缩小等病变现象时,记录产生细胞病变的情况;
e)根据Reed-Muench公式计算半数感染量TCID50。
中科检测可针对病毒保存液检测的不同保存温度、不同保存时间等不同条件下的病毒活性及病毒灭活率。